食品微生物學檢驗β型溶血性鏈球菌檢驗GB/T4789.11-2014第三方檢測機構，GB/T4789.11-2014檢測-十大黃頁站免費|奔赴星辰的我們
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GB 4789.11-2014《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗β型溶血性鏈球菌檢驗》規(guī)定了食品中β型溶血性鏈球菌的檢驗方法，適用于各類食品的檢測。以下是該標準的核心內容：
本標準適用于食品中β型溶血性鏈球菌的檢驗，包括但不限于肉類、乳制品、水產品、飲料、蔬菜、谷物及其制品等。
β型溶血性鏈球菌是一類在血平板上能形成β型溶血圈的細菌，主要包括釀膿（或A群）鏈球菌及無乳（或B群）鏈球菌。其生物學特性如下：
形態(tài)與染色：革蘭氏陽性菌，呈球形或橢圓形，常呈鏈狀排列，長短不一。
培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求較高。在血平板上形成灰白色、半透明、光滑、圓形、邊緣整齊的菌落，周圍可見β型溶血形成透明區(qū)。
抵抗力：對熱、干燥等環(huán)境因素較為敏感，但對桿菌肽、青霉素、紅霉素和磺胺等藥物敏感。
樣品處理：
稱取25g（或25mL）檢樣，加入225mL改良胰蛋白胨大豆肉湯（mTSB）中，均質后制成1:10的勻液。
液態(tài)樣品可直接振蕩均勻后取樣。
增菌培養(yǎng)：
將勻液置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時。
分離培養(yǎng)：
取增菌液劃線接種于哥倫比亞CNA血瓊脂平板上，36℃±1℃厭氧培養(yǎng)18-24小時。
觀察菌落形態(tài)，β型溶血性鏈球菌的典型菌落為灰白色、半透明、光滑、圓形、邊緣整齊，并產生β型溶血。
鑒定：
革蘭氏染色鏡檢：挑取可疑菌落進行革蘭氏染色，β型溶血性鏈球菌為革蘭氏陽性球菌，呈球形或卵圓形，常排列成短鏈狀。
觸酶試驗：挑取可疑菌落，滴加3%，立即產生氣泡者為陽性（β型溶血性鏈球菌觸酶為陰性）。
鏈激酶試驗（選做）：用于進一步確認β型溶血性鏈球菌的鑒定結果。
生化鑒定：使用生化鑒定試劑盒或生化鑒定卡對可疑菌落進行鑒定。
綜合菌落形態(tài)、溶血特征、革蘭氏染色及生化試驗結果，判定樣品中是否檢出β型溶血性鏈球菌。
報告每25g（或25mL）檢樣中檢出或未檢出溶血性鏈球菌。
樣品處理：對于易產生較大顆粒的樣品（如肉類），建議使用帶濾網均質袋，以方便均質后用吸管吸取勻液。
增菌培養(yǎng)：使用均質袋進行前增菌時，應使用帶有底托的均質袋架子，防止培養(yǎng)過程中前增菌袋子歪倒泄漏污染培養(yǎng)箱。
鑒定：在使用全自動微生物分析系統進行鑒定時，應結合其他生物學特性綜合評價后判斷結果。如遇待測菌鑒定評分過低、多個生化反應結果不符或48小時生化反應仍不明顯的情況，應考慮鏈球菌乳化程度不夠、呈顆粒狀、不能形成均勻的菌懸液有關，此時應重復試驗或改用其它方法鑒定。
培養(yǎng)箱管理：培養(yǎng)箱中疊放培養(yǎng)皿時，為防止中間平皿過熱，高度不得超過6個平板。
質量控制：實驗室過程中，每批預增菌液、選擇性增菌液、分離平板等都要做空白對照，以掌握檢驗過程中是否存在來自檢驗環(huán)境的污染。定期使用β型溶血性鏈球菌ATCC19615或相應定量活菌參考品進行陽性實驗驗證，驗證實驗至少每2個月進行1次。每2個月將所使用的培養(yǎng)基和生化試劑用標準菌株或陰性菌株進行驗證，并進行記錄。
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