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藥品中國(guó)藥典2015年版四部0512高效液相色譜法國(guó)標(biāo)檢測(cè)概述如下:

一、方法原理

高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱,對(duì)供試品進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。注入的供試品,由流動(dòng)相帶入色譜柱內(nèi),各組分在柱內(nèi)被分離,并進(jìn)入檢測(cè)器檢測(cè),由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號(hào)。

二、儀器組成

  1. 高壓輸液泵:用于將流動(dòng)相泵入色譜柱,提供穩(wěn)定且連續(xù)的流動(dòng)相流速。

  2. 進(jìn)樣器:用于將供試品注入色譜柱,確保進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

  3. 色譜柱:色譜柱內(nèi)徑一般為3.9~4.6mm,填充劑粒徑為3~10μm。根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì),可選擇不同類(lèi)型的色譜柱,如反相色譜柱、正相色譜柱、離子交換色譜柱和手性分離色譜柱等。

  4. 檢測(cè)器:常用的檢測(cè)器為紫外-可見(jiàn)分光檢測(cè)器,包括二極管陣列檢測(cè)器。其他常見(jiàn)的檢測(cè)器有熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器等。

  5. 積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):用于記錄和處理色譜信號(hào),提供色譜圖和相關(guān)數(shù)據(jù)。

三、色譜條件

  1. 色譜柱選擇:根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)選擇合適的色譜柱類(lèi)型和填充劑。

  2. 流動(dòng)相選擇:反相色譜系統(tǒng)的流動(dòng)相常用甲醇-水系統(tǒng)和乙腈-水系統(tǒng)。用紫外末端波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),宜選用乙腈-水系統(tǒng)。流動(dòng)相中應(yīng)盡可能不用緩沖鹽,如需用時(shí),應(yīng)盡可能使用低濃度緩沖鹽。正相色譜系統(tǒng)的流動(dòng)相常用兩種或兩種以上的有機(jī)溶劑,如二氯甲烷和正己烷等。

  3. 溫度控制:品種正文中未指明色譜柱溫度時(shí)系指室溫,應(yīng)注意室溫變化的影響。為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的溫度,但一般不宜超過(guò)60℃。

  4. 流速控制:根據(jù)色譜柱的類(lèi)型和填充劑的性質(zhì),以及供試品的性質(zhì),選擇合適的流速。

四、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜系統(tǒng)的適用性試驗(yàn)通常包括理論板數(shù)、分離度、靈敏度、拖尾因子和重復(fù)性等五個(gè)參數(shù)。

  1. 理論板數(shù):用于評(píng)價(jià)色譜柱的分離效能。在規(guī)定的色譜條件下,注入供試品溶液或各品種項(xiàng)下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液,記錄色譜圖,量出供試品主成分色譜峰或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)色譜峰的保留時(shí)間和峰寬,計(jì)算色譜柱的理論板數(shù)。

  2. 分離度:用于評(píng)價(jià)待測(cè)物質(zhì)與被分離物質(zhì)之間的分離程度,是衡量色譜系統(tǒng)分離效能的關(guān)鍵指標(biāo)。待測(cè)物質(zhì)色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5。

  3. 靈敏度:用于評(píng)價(jià)色譜系統(tǒng)檢測(cè)微量物質(zhì)的能力,通常以信噪比來(lái)表示。定量測(cè)定時(shí),信噪比應(yīng)不小于10;定性測(cè)定時(shí),信噪比應(yīng)不小于3。

  4. 拖尾因子:用于評(píng)價(jià)色譜峰的對(duì)稱(chēng)性。拖尾因子應(yīng)在0.95~1.05之間。

  5. 重復(fù)性:用于評(píng)價(jià)色譜系統(tǒng)連續(xù)進(jìn)樣時(shí)響應(yīng)值的重復(fù)性能。采用外標(biāo)法時(shí),通常取各品種項(xiàng)下的對(duì)照品溶液,連續(xù)進(jìn)樣5次,其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%。

五、測(cè)定法

  1. 供試品溶液制備:根據(jù)供試品的性質(zhì),選擇合適的溶劑和方法制備供試品溶液。

  2. 對(duì)照品溶液制備:精密稱(chēng)取對(duì)照品適量,用規(guī)定的溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含一定量對(duì)照品的溶液。

  3. 進(jìn)樣與測(cè)定:分別精密吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液適量,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中待測(cè)成分的含量。


關(guān)鍵詞

第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu) , 標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè) , 國(guó)標(biāo)檢測(cè) , 檢測(cè) , 檢測(cè)中心

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經(jīng)營(yíng)范圍

一般項(xiàng)目:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè);生態(tài)資源監(jiān)測(cè);土地調(diào)查評(píng)估服務(wù);工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售;計(jì)量技術(shù)服務(wù);標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù);公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定;環(huán)保咨詢(xún)服務(wù);環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)(除許可業(yè)務(wù)外,可自主依法經(jīng)營(yíng)法律法規(guī)非禁止或限制的項(xiàng)目)許可項(xiàng)目:檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);特種設(shè)備

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     安徽量科檢測(cè)技術(shù)有限公司是一家一站式檢測(cè)服務(wù)中心,為企業(yè)及個(gè)人用戶(hù)提供低成本、高效率、更便捷的檢測(cè)服務(wù)。     主要提供的服務(wù)有:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè);生態(tài)資源監(jiān)測(cè);土地調(diào)查評(píng)估服務(wù);工程和技術(shù)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;終端計(jì)量設(shè)備銷(xiāo)售;計(jì)量技術(shù)服務(wù);標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù);公路水運(yùn)工程試驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);進(jìn)出口商品檢驗(yàn)鑒定;環(huán)保咨詢(xún)服務(wù);環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)許可項(xiàng)檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù);特種設(shè)備檢驗(yàn)檢測(cè);...

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