對(duì)象：食品、食品添加劑、食品加工環(huán)境樣品等。

目標(biāo)：大腸菌群（Coliforms），指在特定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧或兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。

不適用對(duì)象：非食品樣品（如藥品、化妝品等）。

適用場景：適用于大腸菌群含量較低的食品中大腸菌群的計(jì)數(shù)。

操作步驟：

樣品稀釋：將樣品進(jìn)行系列稀釋，制成不同濃度的樣品勻液。

初發(fā)酵試驗(yàn)：每個(gè)稀釋度接種多管月桂基鹽胰蛋白胨（LST）肉湯，培養(yǎng)后觀察產(chǎn)氣情況。

復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)（證實(shí)試驗(yàn)）：將產(chǎn)氣的LST肉湯管中的培養(yǎng)物移種于煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯管中，培養(yǎng)后觀察產(chǎn)氣情況，產(chǎn)氣者計(jì)為大腸菌群陽性管。

結(jié)果報(bào)告：根據(jù)陽性管數(shù)檢索MPN表，報(bào)告每克（毫升）樣品中大腸菌群的MPN值。

適用場景：適用于大腸菌群含量較高的食品中大腸菌群的計(jì)數(shù)。

操作步驟：

樣品稀釋：同樣將樣品進(jìn)行系列稀釋。

平板計(jì)數(shù)：選取適宜稀釋度的樣品勻液，接種于結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）平板上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)典型和可疑大腸菌群菌落。

證實(shí)試驗(yàn)：從VRBA平板上挑取典型和可疑菌落，移種于BGLB肉湯管中，培養(yǎng)后觀察產(chǎn)氣情況。

結(jié)果報(bào)告：根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽性的試管比例乘以平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每克（毫升）樣品中大腸菌群數(shù)。

樣品處理：確保樣品具有代表性，避免污染。固體和半固體樣品需均質(zhì)處理，液體樣品可直接稀釋。

培養(yǎng)基準(zhǔn)備：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)配制相應(yīng)的培養(yǎng)基，確保無菌性和成分準(zhǔn)確。

培養(yǎng)條件：在規(guī)定的溫度和時(shí)間條件下進(jìn)行培養(yǎng)，確保培養(yǎng)條件符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

計(jì)數(shù)方法：采用多管發(fā)酵法或平板計(jì)數(shù)法測定大腸菌群，確保操作規(guī)范，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。

數(shù)據(jù)處理：對(duì)測定數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，確保數(shù)據(jù)處理方法符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

合格判定：大腸菌群數(shù)量≤標(biāo)準(zhǔn)限量為合格。

不合格判定：大腸菌群數(shù)量>標(biāo)準(zhǔn)限量為不合格。

操作規(guī)范：嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行檢測，避免操作誤差。

質(zhì)量控制：定期進(jìn)行質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

安全防護(hù)：在檢測過程中注意個(gè)人防護(hù)，避免交叉污染。