狂犬病毒 抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

使  用  說  明（96T/48T）

[原理]

本試劑盒采用親和素-生物素化Ra純化抗原預(yù)包被板ELISA 原理，檢測人血清/血漿中存在的狂犬病毒 IgM 抗體，并配以酶標記抗人IgM單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng)，在450nm波長測各孔O.D值，O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。生物素系統(tǒng)（biotin-avidin system）的穩(wěn)固級聯(lián)放大作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性極大地提高是本試劑含有的獨特優(yōu)點。

[用途]

本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿中的狂犬病毒（RABIES VIRUS）IgM抗體，對因動物咬傷而致感染了狂犬病毒的診斷、流行病學(xué)調(diào)研和疫苗監(jiān)測有重要意義。

適應(yīng)范圍：

動物咬傷致狂犬病毒感染的診斷和監(jiān)測。

[試劑盒組成]

1、生物素化抗原預(yù)包被板     1塊（8X12/4X12）

2、陰性對照                 1瓶（直接使用）         

3、陽性對照                1瓶（直接使用）

4、標本稀釋液          1瓶（20/10 ml，直接使用）

5、酶結(jié)合物             1瓶（12/5ml，直接使用）

6、30X濃縮洗液             

1瓶（20/10ml，加蒸餾水1：30稀釋使用）

7、顯示劑A、B液               各1瓶（5/3ml）

8、終止液（2M H2SO4）            1瓶（5/3ml）

9、說明書                        1份

[操作步驟]

1. 將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。

1. 加樣：將待檢標本用標本稀釋液作1：101　　　?。?ul—200ul）稀釋，分別加待檢標本及陰陽性對照100ul各一孔于反應(yīng)板中，設(shè)空白對照一孔輕拍混勻。

2. 37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。

3. 加酶結(jié)合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。

4. 顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。

[結(jié)果判斷]

1. 目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，蘭色者為陽性，無色者為陰性。

2. 酶標儀測定：每孔加終止液一滴，混勻后在450nm下測定各孔O.D值。

① P/N=標本O.D值/陰性對照O.D值。        

② P/N≥2.1為陽性；

③ 1.5≤P/N<2.1為可疑標本;P/N<1.5為陰性。

④  陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計,大于0.1小于0.21時以實際O.D值計算;若大于0.21時,實驗可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實驗。

⑤  陽性對照(PC)值通?！?.4,實驗成立,否則需重做。

[注意事項]

1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時保持瓶身垂直。

3. 洗滌時每孔均須加滿，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。

4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結(jié)，有效期10個月。

5. 避免用溶血、混濁或脂血標本。

6. **用新鮮標本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周（樣本應(yīng)避光）。

）。