傷寒、副傷寒桿菌抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

使  用  說(shuō)  明（96T/48T）

[原理]

本試劑盒采用親和素-生物素化Sp-抗原（A、B、C）預(yù)包被板ELISA 原理，檢測(cè)人血清/血漿中存在的Sp- IgG抗體，并配以酶標(biāo)記抗人IgG（h+l鏈）單克隆抗體作為標(biāo)記物。加入底物TMB顯色后終止反應(yīng)，在450nm波長(zhǎng)測(cè)各孔O.D值，O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。生物素系統(tǒng)（biotin-avidin system）的穩(wěn)固級(jí)聯(lián)放大作用，使試劑的特異性、靈敏度、穩(wěn)定性極大地提高。

[用途]

   本試劑盒用于定性檢測(cè)人血清/血漿中的副傷寒沙門(mén)桿菌（Sp）IgG抗體，對(duì)傷寒桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查和追蹤傳染源有重要的價(jià)值，操作優(yōu)于肥達(dá)氏反應(yīng)，簡(jiǎn)便、快速、靈敏。

[試劑盒組成]

1、生物素化抗原預(yù)包被板     1塊（8X12/4X12） 2、陰性對(duì)照                 1瓶

3、陽(yáng)性對(duì)照                 1瓶

4、標(biāo)本稀釋液                1瓶（20ml/10ml）

5、酶結(jié)合物                 1瓶（12/5ml）

6、30X濃縮洗液             

1瓶（20/10ml，加蒸餾水1：30稀釋使用）

7、顯示劑A、B液           各1瓶（5/3ml）

8、終止液（2M H2SO4）      1瓶（5/3ml）

9、說(shuō)明書(shū)                   1份

[操作步驟]

1、將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封后置于板  

架上。

2、樣本稀釋?zhuān)河脴?biāo)本稀釋液以1：101（5ul—500ul）稀釋標(biāo)本，分別加已稀釋的待檢標(biāo)本及設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照100ul各一孔于反應(yīng)板中，設(shè)空白對(duì)照一孔（加100ul標(biāo)本稀釋液），輕拍混勻。

3、37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板      3次并在吸水紙上拍干。

4、加酶結(jié)合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。

5、顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。

[結(jié)果判斷]

1.  目測(cè)：在白色背景下觀(guān)察各孔顯色情況，藍(lán)色者    為陽(yáng)性，無(wú)色者為陰性。

2.  酶標(biāo)儀測(cè)定：每孔加終止液一滴，混勻后在450nm   下測(cè)定各孔O.D值。

① P/N=標(biāo)本O.D值/陰性對(duì)照O.D值。        

② P/N≥2.1為陽(yáng)性；

③ 1.5≤P/N<2.1為可疑標(biāo)本;P/N<1.5為陰性。

④ 陰性對(duì)照(NC)小于0.10時(shí)以0.10計(jì),大于0.1小于0.21時(shí)以實(shí)際O.D值計(jì)算;若大于0.21時(shí),實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

⑤陽(yáng)性對(duì)照(PC)值通?！?.4,實(shí)驗(yàn)成立,否則需重做。

 [注意事項(xiàng)]

1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應(yīng)置  室溫平衡至潮氣盡干后方可開(kāi)啟使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時(shí)保持瓶身垂直。

3. 洗滌時(shí)每孔均須加滿(mǎn)，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。

4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結(jié)，有效期10個(gè)月。

5. 避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。

6. **用新鮮標(biāo)本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時(shí)或-20℃凍存4周（樣本應(yīng)避光）。