飼料中蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料中蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè)。

3術(shù)語和定義

3.1

蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus

在選擇性培養(yǎng)基上能形成典型菌落,并經(jīng)本標(biāo)準(zhǔn)指定的方法確證為陽性的細(xì)菌。

4原理

4.1在選擇性固體培養(yǎng)基平板表面涂布特定量的待測(cè)液體樣品或特定量的其他類型待測(cè)樣品的初始懸液。在相同的條件下制備待測(cè)樣品或初始懸液的十倍梯度稀釋物。

4.2平板30 ℃培養(yǎng)18 h~48 h。

4.3典型菌落的數(shù)量用確證試驗(yàn)證實(shí),計(jì)算每毫升或每克試樣中蠟樣芽孢桿菌菌數(shù)。

5稀釋液﹑培養(yǎng)基及試劑

除非另有說明,在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑,實(shí)驗(yàn)室用水采用蒸餾水或去離子水,或相當(dāng)純度的水。

5.1蛋白陳生理鹽水稀釋液:參見附錄A中的A.1。

5.2甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)瓊脂培養(yǎng)基;參見附錄A中的A.2。

5.3羊血瓊脂:參見附錄A中的A.3。

5.4 革蘭氏染色液:參見附錄A中的A.4。

5.5 動(dòng)力培養(yǎng)基:參見附錄A中的A.5。

5.6甲醇。

8試樣的制備

按照GB/T 20195進(jìn)行試樣的制備,樣品制備后應(yīng)盡快檢驗(yàn)。

9操作步驟

9.1檢樣制備、初始懸液和十倍稀釋

以無菌操作稱取試樣25 g(mL)加人225 mL蛋白陳生理鹽水稀釋液,均質(zhì)1 min~2min,制成1∶10的初始懸液。吸取1∶10的稀釋液1 mL,加入9 mL蛋白陳生理鹽水稀釋液,經(jīng)充分混勻后制成1 :100的稀釋液。更高稀釋度可按此方法操作。