Arf3 GTP 武漢紐斯特-電影南拳王メイリン モデルコレクション メ,噗呲噗呲 真爽 再深一點(diǎn)
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檢測(cè)步驟
Ι?；钚訡dc42 Pull-Down實(shí)驗(yàn)
1. 等分0.5-1 mL的細(xì)胞裂解物至微量離心管中。
2. 向管中加入1mL的1X Assay/Lysis 緩沖液。
3. 向管中加入1ul的活性Cdc42單克l隆抗l體。
4. 用渦旋振蕩儀將protein A/G凝膠柱充分混勻，然后快速的吸出20ul懸浮珠漿液加入離心管中。
5. 將管置于4°C條件下孵育1H，并輕輕的進(jìn)行搖動(dòng)。
6. 5000g，Arf3-GTP，離心1分鐘。
7. 棄上清，這一步要非常小心以避免珠子的損失。
8. 用0.5 mL的1X Assay/Lysis緩沖液洗滌珠子三次，離心并棄去上清。
9. 后一次洗滌后，小心的移去所有的上清。
10. 用20ul的2X SDS-PAGE樣品緩沖液重懸樣品。
11. 樣品煮沸5min。
12. 5000g，離心10s。
分析原理
基于構(gòu)型特異性抗Gα13-GTP的NewEast生物科學(xué)Gα13活化檢測(cè)試劑盒從細(xì)胞提取物或體外檢測(cè)活性Gα13-GTP水平的單克l隆抗l體GTPγS負(fù)載Gα13活化試驗(yàn)。簡(jiǎn)單地說(shuō)，抗活性Gα13小鼠單克l隆抗l體用含有Gα13-GTP的細(xì)胞裂解液培養(yǎng)。結(jié)合的活性Gα13將被蛋白質(zhì)A/G瓊脂糖。用兔抗α13多克l隆抗l體免l疫印跡法檢測(cè)沉淀的活性Gα13。
1. VASP通過(guò)調(diào)節(jié)Rab11依賴性TGF-β受體的質(zhì)膜靶向來(lái)促進(jìn)肝星狀細(xì)胞的TGF-β活化
肝l病學(xué)第61卷，首1期，第361-374頁(yè)，2015年1月
2. Rab5活性調(diào)節(jié)GLUT4分類為胰島素反應(yīng)性和非胰島素反應(yīng)性內(nèi)體室：胰島素抵抗發(fā)展的潛在機(jī)制。
內(nèi)分l泌學(xué)。 2014年9月; 155（9）：3315-28
將裂解液轉(zhuǎn)移到適當(dāng)大小的試管中，并置于冰上。
如果發(fā)生核裂解，則細(xì)胞裂解液可能變得非常粘稠，難以移液。如果發(fā)生這種情況，可將裂解液通過(guò)27?號(hào)注射l器針頭3-4次以剪切基因組DNA。
通過(guò)離心10分鐘（在4°C下為12，000 x g）清除裂解物。
收集上清液并將樣品保存在冰上以備立即使用，或速凍并保存在-70°C以便將來(lái)使用。
G蛋白活性,cAMP和cGMP ELISA試劑盒,蛋白點(diǎn)突變
生物工程及生物醫(yī)學(xué)工程產(chǎn)品的開發(fā)，生物技術(shù)研發(fā)、轉(zhuǎn)讓及咨詢服務(wù)；生物工程設(shè)備銷售。貨物進(jìn)出口、技術(shù)進(jìn)出口、代理進(jìn)出口（不含國(guó)家禁止或限制進(jìn)出口的貨物或技術(shù)）。