血清血液禽白血病病毒p27抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗方法NY/T 680-2003國標(biāo)檢測，血清血液檢測中心-國產(chǎn)又粗又猛又大爽又黃メイリン モデルコレクション メイ,老司機(jī)天堂成人倫理視頻
- 報價
- ￥100.00元每樣品
- 聯(lián)系手機(jī)
- 19956099398
- 微信號
- cp19956099398
- 資質(zhì)
- CMA CNAS
- 周期
- 7-10工作日左右
- 服務(wù)范圍
- 全國
NY/T 680-2003《禽白血病病毒p27抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗方法》國標(biāo)檢測的核心要點如下：
標(biāo)準(zhǔn)編號：NY/T 680-2003
發(fā)布日期：2003年7月30日
實施日期：2003年10月1日
適用范圍：適用于檢測雞蛋蛋清以及雞胚組織細(xì)胞培養(yǎng)物中的禽白血病病毒（ALV）p27蛋白抗原。
技術(shù)基礎(chǔ)：基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）技術(shù)。
反應(yīng)過程：將特異性識別p27抗原的抗體固定于固相載體上，加入待檢樣品后，若樣品中含有p27抗原，則抗原與固相上的抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入另一種標(biāo)記有酶的抗體，這種抗體同樣能特異性地與p27抗原結(jié)合。再次洗滌并添加底物溶液，通過酶催化底物產(chǎn)生顏色變化，Zui后借助于酶標(biāo)儀測量每個孔內(nèi)的吸光度值，從而間接反映出樣品中p27抗原的含量。
抗p27蛋白抗體：應(yīng)用提純的禽成髓細(xì)胞性白血病病毒p27蛋白免疫家兔制備。
陽性抗原：含雞白血病/肉瘤病毒群特異性p27蛋白抗原的雞蛋清。
陰性抗原：無雞白血病/肉瘤病毒群特異性p27蛋白抗原的SPF雞蛋清。
酶結(jié)合物：辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗p27蛋白抗體。
其他試劑：包括磷酸鹽緩沖液（PBS）、包被液、洗滌液、樣品稀釋液、底物溶液、終止液等。
酶聯(lián)檢測儀：用于讀取吸光值，需具備450nm波長檢測功能。
聚苯乙烯板：用于包被抗體和進(jìn)行ELISA反應(yīng)。
微量加樣器：容量50μL~200μL，用于準(zhǔn)確量取各種試劑和樣本。
恒溫培養(yǎng)箱：用于樣本和試劑的溫育，需能控制溫度。
樣本采集與處理：
雞蛋樣品：將待檢雞蛋小的一端朝上放置，打碎蛋殼，用移液器無菌吸取蛋清，密裝于滅菌小瓶內(nèi)。
細(xì)胞培養(yǎng)物：用移液器無菌吸取細(xì)胞培養(yǎng)物，密裝于滅菌小瓶內(nèi)，4℃或-30℃保存或立即送檢。試驗前將送檢樣品統(tǒng)一編號，試驗時不做稀釋。
包被板制備：
用包被液將抗p27蛋白抗體作4000倍稀釋，每孔100μL加入96孔聚苯乙烯板中，4℃過夜。
加樣與反應(yīng)：
取出包被好的聚苯乙烯板，將液體倒棄，每孔加250μL洗滌液漂洗三次，每次2min，甩干。
每孔加150μL質(zhì)量濃度為1%的明膠封閉液，37℃反應(yīng)60min。
重復(fù)洗滌步驟。
在A1、A2孔各加100μL標(biāo)準(zhǔn)陰性對照，A3、A4孔各加100μL標(biāo)準(zhǔn)陽性對照。
將待檢樣品加入其他各孔，每個待檢樣本加兩孔，每孔100μL，37℃反應(yīng)60min。
重復(fù)洗滌步驟。
每孔加100μL工作濃度的辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗p27蛋白抗體，37℃反應(yīng)60min。
重復(fù)洗滌步驟。
每孔加100μL新配制的底物溶液，室溫、避光反應(yīng)10min。
每孔加100μL終止液。
結(jié)果讀取與判定：
置酶聯(lián)檢測儀于450nm測定各孔吸光度（OD）值。
陰性對照OD均值=（ODA1+ODA2）/2；陽性對照OD均值=（ODA3+ODA4）/2。
陰性對照OD均值小于0.15，陽性對照OD均值減去陰性對照OD均值大于0.3時試驗成立，否則重做。
計算樣品孔OD均值與陰性對照OD均值的比值（SIP），當(dāng)SIP小于等于0.2時判為陰性，表示待檢樣品中無ALVp27蛋白抗原；當(dāng)SIP大于0.2時判為陽性，表示待檢樣品中有ALVp27蛋白抗原。
第三方檢測機(jī)構(gòu) , 標(biāo)準(zhǔn)檢測 , 國標(biāo)檢測 , 檢測 , 檢測中心
第三方檢測技術(shù)服務(wù)，涂料檢測服務(wù)，環(huán)境生態(tài)監(jiān)測，計量檢測服務(wù)
一般項目：環(huán)境保護(hù)監(jiān)測；生態(tài)資源監(jiān)測；土地調(diào)查評估服務(wù)；工程和技術(shù)研究和試驗發(fā)展；醫(yī)學(xué)研究和試驗發(fā)展；自然科學(xué)研究和試驗發(fā)展；農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗發(fā)展；終端計量設(shè)備銷售；計量技術(shù)服務(wù)；標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)；公路水運工程試驗檢測服務(wù)；進(jìn)出口商品檢驗鑒定；環(huán)保咨詢服務(wù)；環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)（除許可業(yè)務(wù)外，可自主依法經(jīng)營法律法規(guī)非禁止或限制的項目）許可項目：檢驗檢測服務(wù)；特種設(shè)備
安徽量科檢測技術(shù)有限公司是一家一站式檢測服務(wù)中心，為企業(yè)及個人用戶提供低成本、高效率、更便捷的檢測服務(wù)。 主要提供的服務(wù)有:環(huán)境保護(hù)監(jiān)測；生態(tài)資源監(jiān)測；土地調(diào)查評估服務(wù)；工程和技術(shù)研究和試驗發(fā)展；醫(yī)學(xué)研究和試驗發(fā)展；自然科學(xué)研究和試驗發(fā)展；農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗發(fā)展；終端計量設(shè)備銷售；計量技術(shù)服務(wù)；標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)；公路水運工程試驗檢測服務(wù)；進(jìn)出口商品檢驗鑒定；環(huán)保咨詢服務(wù)；環(huán)境應(yīng)急治理服務(wù)許可項檢驗檢測服務(wù)；特種設(shè)備檢驗檢測；...