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黃原膠又稱(chēng)黃膠、漢生膠,黃單胞多糖,是一種由假黃單胞菌屬發(fā)酵產(chǎn)生的單孢多糖,由甘藍(lán)黑腐病野油菜黃單胞菌以碳水化合物為主要原料,經(jīng)好氧發(fā)酵生物工程技術(shù),切斷1,6-糖苷鍵,打開(kāi)支鏈后,在按1,4-鍵合成直鏈組成的一種酸性胞外雜多糖。1952年由美國(guó)農(nóng)業(yè)部伊利諾斯州皮奧里爾北部研究所分離得到的甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌,并使甘藍(lán)提取物轉(zhuǎn)化為水溶性的酸性胞外雜多糖而得到。

黃原膠是由糖類(lèi)經(jīng)黃單胞桿菌發(fā)酵,產(chǎn)生的胞外微生物多糖。由于它的大分子特殊結(jié)構(gòu)和膠體特性,而具有多種功能,可作為乳化劑、穩(wěn)定劑、凝膠增稠劑、浸潤(rùn)劑、膜成型劑等,廣泛應(yīng)用于國(guó)民經(jīng)濟(jì)各領(lǐng)域。

中國(guó)對(duì)黃原膠的研究起步較晚,1985年南開(kāi)大學(xué)率先研究食品級(jí)黃原膠,對(duì)黃原膠產(chǎn)品進(jìn)行了毒理學(xué)試驗(yàn),對(duì)生產(chǎn)黃原膠的菌株進(jìn)行毒性試驗(yàn),結(jié)果表明黃原膠和菌株均沒(méi)有毒性。1988年國(guó)家衛(wèi)生部批準(zhǔn)食品級(jí)黃原膠的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),并被列入食品添加劑名單。2007年頒布實(shí)施的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(食品添加劑-黃原膠)GB13886-2007采用了FCC和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)聯(lián)合食品添加劑專(zhuān)家委員會(huì)(JECFA,1999)的技術(shù)規(guī)格,與1992年的標(biāo)準(zhǔn)相比,修訂了一些技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定了更加嚴(yán)格的檢測(cè)指標(biāo)。

折疊編輯本段鑒別試驗(yàn)

溶解性:溶于水,不溶于乙醇(OT-42)。

凝膠形成試驗(yàn)取水300ml,置于400ml燒杯內(nèi),預(yù)熱至80℃,在劇烈的機(jī)械攪拌下,加入試樣1.5g和粉狀角豆菜膠1.5g。攪拌至形成溶液后,再繼續(xù)攪拌30min。在攪拌過(guò)程中,水溫不得低于60℃停止攪拌,在室溫下冷卻2h以上。當(dāng)溫度低于40℃時(shí),應(yīng)形成堅(jiān)硬的橡膠狀凝膠,但若僅用試樣而不加角豆菜膠以相同方法配制成的1%對(duì)照液,則不會(huì)形成這樣的凝膠。

折疊編輯本段含量分析

準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣1.2g,按GT-7方法測(cè)定。每mL0.25mol/L氫氧化鈉相當(dāng)于5.5mg二氧化碳(CO2)。

折疊編輯本段毒性

小鼠經(jīng)口LD50>10 g/kg。ADI不需要規(guī)定。

可安全用于食品(FDA,§172.695,2000)。

折疊編輯本段生產(chǎn)方法

(1)由含有糖類(lèi)(如葡萄糖、蔗糖、淀粉、水解淀粉等)的發(fā)酵培養(yǎng)基,在適宜的氮源、磷酸氫二鉀和適量的微量元素存在下,由野油菜黃單胞菌菌株作用,進(jìn)行發(fā)酵,再經(jīng)后提取、干燥、粉碎等工序制得。

(2)將含有1%~5%的葡萄糖和無(wú)機(jī)鹽的培養(yǎng)基調(diào)整至pH值為6.0~7.0,加入野油菜黃單胞菌(Xanthomonascampestris)接種體,培養(yǎng)50~100h,得到4~12Pa?s的高粘度液體。殺菌后,加入異丙醇或乙醇使其沉淀,再用異丙醇或乙醇精制后干燥、粉碎而得。

(3)以葡萄糖或淀粉為碳源,蛋白水解物或無(wú)機(jī)銨為氮源,用黃桿菌屬的甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌培養(yǎng)發(fā)酵,用有機(jī)溶劑提取或高價(jià)金屬鹽沉淀的方法從培養(yǎng)液中分離出黃原膠。

提取

中國(guó)提取黃原膠的方法有全溶劑法和鈣鹽法,產(chǎn)品往往含有大量菌體。為此可用酶解法除去菌體,即先向發(fā)酵液中加入0.01%~0.05%的溶菌酶,在53℃、Ph值5.5的條件下分解2h。再在40℃、Ph值7.2的條件下加入0.1%~0.5%的中性蛋白酶酶解4h。后加熱滅酶、冷卻后進(jìn)入下一工序。

鈣鹽法:將發(fā)酵清液調(diào)Ph值至11.5,加入氯化鈣使黃原膠鈣沉淀出來(lái);離心分離后分散于乙醇中解聚,再經(jīng)過(guò)濾、乙醇洗滌、干燥得成品。

全溶劑法:向上述處理過(guò)的發(fā)酵清液中加入大量的乙醇或異丙醇,使黃原膠沉析出來(lái);經(jīng)離心分離、干燥后即得成品。

發(fā)酵培養(yǎng)

發(fā)酵培養(yǎng)為有利于產(chǎn)品提取分離,通常采用清液發(fā)酵。培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2.5%,(NH4)3PO40.15%,MgSO40.01%,KH2PO40.25%,Ph=7土0.1。在28~30℃下黃單胞菌(魯輕P26-9)斜面培養(yǎng)3d,搖瓶培養(yǎng)后再在28℃下種子罐培養(yǎng)16~18h,接入發(fā)酵罐后在28~30℃培養(yǎng)3d。


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