糞腸球菌為革蘭氏陽性，過氧化氫陰性球菌。其原屬于鏈球菌屬，因其與其他鏈球菌同源程度低，甚至不到9%，故將糞腸球菌與屎腸球菌從鏈球菌屬中分離出來，將其歸為腸球菌屬。糞腸球菌是一種兼性厭氧型革蘭氏陽性乳酸菌，菌體形態(tài)為球狀或鏈狀，直徑大小，無莢膜，無芽孢，對環(huán)境適應(yīng)力和抵抗力強，可耐受四環(huán)素、卡那霉素、慶大霉素等多種抗生素，生長條件要求不嚴格。它可利用精氨酸為能源，發(fā)酵山梨醇，不發(fā)酵阿拉伯糖。在簡單的培養(yǎng)基上生長不需葉酸。

鑒別要點

1.本菌特征

革蘭陽性球菌，觸酶試驗陰性，在6.5%NaCl中生長，膽汁七葉苷試驗陽性，45℃中生長。

2.與鏈球菌屬和乳球菌屬的鑒別

腸球菌屬能在pH9.6的肉湯和45℃環(huán)境中生長，膽汁七葉苷和鹽耐受試驗陽性，而鏈球菌屬和乳球菌屬則相反。

3.與屎腸球菌、鳥腸球菌的鑒別

糞腸球菌不分解L-阿拉伯糖，分解山梨覓醇。屎腸球菌能分解Ⅰ-阿拉伯糖，不分解山梨醇。鳥腸球菌分解L-阿拉伯糖、山梨醇。

4.與鉛黃腸球菌、鶉雞腸球菌的鑒別

糞腸球菌不分解鼠李糖，亞碲酸鹽試定驗陽性，鉛黃腸球菌、鶉雞腸球菌則相反。鉛黃腸球菌與鶉雞腸球菌的區(qū)別，鉛黃腸球菌產(chǎn)黃色素鶉雞腸球菌則不產(chǎn)。

關(guān)于糞腸球菌，北京清析技術(shù)研究院可提供生長曲線測定，毒力基因測定，生物膜總蛋白含量測定，PCR定量測定，分離鑒定測定等檢測項目。同時，北京清析技術(shù)研究院可對豬源糞腸球菌，孵化死胚糞腸球菌，出殼雛雞病原菌，動物源性糞腸球菌，飼料糞腸球菌，酵素糞腸球菌等進行檢測。

檢驗方法

a.多管法

用適當?shù)南♂屢航臃N一套疊氮化鈉葡萄糖肉湯管。接種量為1mL或以下的，使用10mL單料管；接種量為10mL，使用10mL雙料管。35℃培養(yǎng)24-48h，并檢查記錄各管的混濁情況。用接種環(huán)將渾濁管中的培養(yǎng)物劃線于PSE平板上，倒置平板于36℃培養(yǎng)24h。平板上出現(xiàn)的帶棕色環(huán)的黑色菌落，確證為糞鏈球菌。根據(jù)接種的樣品量和確證為是糞鏈球菌的管數(shù)，查MPN表，報告每克樣品中的糞鏈球菌MPN值。

b.平板計數(shù)法

取1mL適當稀釋液加入培養(yǎng)皿內(nèi)，傾入12-15mL的KF或PSE培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)動平板充分混合。凝固后置36℃培養(yǎng)，KF平板培養(yǎng)48h，PSE平板培養(yǎng)24h。糞鏈球菌在KF平板上形成暗紅色至粉紅色菌落，邊緣整齊，瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀；在PSE平板上形成帶棕色環(huán)的棕黑色菌落。選擇有30-300個菌落的平板進行記數(shù)。按糞鏈球菌數(shù)/g(mL)報告結(jié)果。

檢測標準

1、DB41/T 1903-2019 飼料添加劑 糞腸球菌

2、DB13/T 5573-2022 雞糞腸球菌病綜合診斷技術(shù)規(guī)程

3、T/SHAAV生物飼料添加劑中糞腸球菌的測定

4、DB21/T 3061-2018飼用微生物制劑中糞腸球菌的檢測方法