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熱原檢查法(家兔法) 系將一定劑量的供試品,靜脈注入家兔體內(nèi),觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。

一、供試用家兔  

供試品用家兔應(yīng)健康合格,體重1.7~3.0Kg,雌兔應(yīng)無(wú)孕。預(yù)測(cè)體溫前7日即應(yīng)用同一飼料飼養(yǎng),在此期間內(nèi),體重應(yīng)不減輕,精神、食欲、排泄等不得有異常現(xiàn)象。未經(jīng)使用于熱原檢查的家兔;或供試品判定為符合規(guī)定,但組內(nèi)升溫達(dá)0.6℃的家兔,或3周內(nèi)未曾使用的家兔,均應(yīng)在檢查供試品前3~7日內(nèi)預(yù)測(cè)體溫,進(jìn)行挑選。挑選試驗(yàn)的條件與檢查供試品時(shí)相同,僅不注射藥液,每隔30分鐘測(cè)量體溫1次,共測(cè)8次,8次體溫均在38.0~39.6℃的范圍內(nèi),且Zui高與Zui低體溫的差不超過(guò)0.4℃的家兔,方可供熱原檢查用。用于熱原檢查后的家兔,如供試品判定為符合規(guī)定,至少應(yīng)休息2日方可供第2次檢查用。如供試品判定為不符合規(guī)定,則組內(nèi)全部家兔不再使用。每一家兔的使用次數(shù),用于一般藥品的檢查,不應(yīng)超過(guò)10次。

 

二、試驗(yàn)前的準(zhǔn)備
在作熱原檢查前1~2日,供試用家兔應(yīng)盡可能處于同一溫度的環(huán)境中,實(shí)驗(yàn)室和飼養(yǎng)室的溫度相差不得大于5℃,實(shí)驗(yàn)室的溫度應(yīng)在17~28℃,在試驗(yàn)全部過(guò)程中,應(yīng)注意室溫變化不得大于3℃,避免噪音干擾。家兔在試驗(yàn)前至少1小時(shí)開(kāi)始停止給食并置于適宜的裝置中,直至試驗(yàn)完畢。家兔體溫應(yīng)使用精密度為±0.1℃的肛溫計(jì),或其他同樣jingque的測(cè)溫裝置。肛溫計(jì)插入肛門的深度和時(shí)間各兔應(yīng)相同,深度一般約6cm,時(shí)間不得少于1分半鐘,每隔30分鐘測(cè)量體溫1次,一般測(cè)量2次,兩次體溫之差不得超過(guò)0.2℃,以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當(dāng)日使用的家兔,正常體溫應(yīng)在38.0~39.6℃的范圍內(nèi),且各兔間正常體溫不得超過(guò)1℃。

 

試驗(yàn)用的注射器、針頭及一切與供試品溶液接觸的器皿,應(yīng)置烘箱中用250℃加熱30分鐘或用180℃加熱2小時(shí),也可用其他適宜的方法除去熱原。

 

三、檢查法
 取適用的家兔3只,則定其正常體溫后15分鐘以內(nèi),自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液,然后每隔30分鐘按前法測(cè)量其體溫1次,共測(cè)6次,以6次體溫中Zui高一次減去正常體溫,即為該兔體溫的升高溫度(℃)。如3只家兔中有1只體溫升高0.6℃或0.6℃以上,或3只家兔體溫升高均低于0.6℃,但體溫升高的總和達(dá)1.4℃以上,應(yīng)另取5只家兔復(fù)試,檢查方法同上。

 

四、結(jié)果判斷  
在初試3只家兔中,體溫升高均低于0.6℃,并且3只家兔體溫升高總和低于1.4℃;或在復(fù)試的5只家兔中,體溫升高0.6℃或0.6℃以上的兔數(shù)僅有1只,并且初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和為3.5℃或3.5℃以下,均認(rèn)為供試品的熱原檢查符合規(guī)定。

 

在初試3只家兔中,體溫升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超過(guò)1只;或在復(fù)試的5只家兔中,體溫升高0.6℃以上的家兔超過(guò)1只;或在初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和超過(guò)3.5℃,均認(rèn)為供試品的熱原檢查不符合規(guī)定。


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