Lenti-X293T人胚腎細(xì)胞介紹

HEK-293T細(xì)胞是293T（293tsA1609neo）細(xì)胞系（ATCCCRL-11268）的衍生物。細(xì)胞持續(xù)表達(dá)SV40抗原，該細(xì)胞常用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染效率較高。

（轉(zhuǎn)染一般以50%密度鋪板，待細(xì)胞剛剛貼到皿壁上后（一般8-10小時(shí)），即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作)。

細(xì)胞特性

1） 來源：人胚胎腎臟

2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長，貼壁能力較弱

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，

請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的

依據(jù)。

3）半貼細(xì)胞和貼壁不牢（懸浮）細(xì)胞：該細(xì)胞貼壁不是很牢，運(yùn)輸過程中會(huì)有部分細(xì)胞飄起或者成團(tuán)，屬于正?，F(xiàn)象，收到細(xì)胞后請先放培養(yǎng)箱穩(wěn)定 

2-4h 后再拍照留檔，密度大于80%時(shí)再進(jìn)行處理，處理時(shí)，離心上清，將上清中的細(xì)胞一同收集處理即可。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次

傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1） 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗 1%。

注意：

1.該細(xì)胞貼壁不是很牢，運(yùn)輸過程中會(huì)有部分細(xì)胞飄起或者成團(tuán)，屬于正常現(xiàn)象，收到細(xì)胞后請先放培養(yǎng)箱穩(wěn)定 2-4h 后再拍照留檔，密度大于80%時(shí)

再進(jìn)行處理，處理時(shí)，離心上清，將上清中的細(xì)胞一同收集處理即可。

2.培養(yǎng)時(shí)可酌情使用預(yù)鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿。完全培養(yǎng)液中需添加熱滅活胎牛血清。細(xì)胞生長不能過密，過密細(xì)胞容易脫落，脫落下來的細(xì)胞

可以通過離心收集，使用0.25%Trypsin-0.53 mM EDTA 消化后繼續(xù)培養(yǎng)。

2） 培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

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多種，細(xì)胞庫內(nèi)細(xì)胞株自引種在庫傳代次數(shù)5代以內(nèi)，代次低，狀態(tài)好，活性高。原代細(xì)胞包括人源、鼠源、兔源、豬源、羊源以及其它動(dòng)物源近700多

種，3000多株現(xiàn)貨。所有的細(xì)胞進(jìn)行批量凍存，嚴(yán)格的代次管控，且經(jīng)過無菌和無支原體檢測，質(zhì)量可靠。

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高效；

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