4人造板防霉性能檢驗(yàn)方法

4.1 儀器設(shè)備與器皿

4.1.1蒸汽高壓滅 菌器:Zui高設(shè)計(jì)溫度138 C ,Zui高設(shè)計(jì)壓力0. 25 MPa.

4.1.2超凈工作 臺(tái):潔凈等級(jí)不低于100級(jí)。

4.1.3恒溫恒濕培養(yǎng)箱:控溫范圍(0~65)°C ,控濕范圍60% ~90%.

4.1.4天平:感量0.01 g.

4.1.5移液器:1 0000 μL。

4.1.6離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥5 000 r/min.

4.1.7生物光學(xué) 顯微鏡:40X ~400X.

4.1.8 血球計(jì)數(shù)板:醫(yī)學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)用。

4.1.9 培養(yǎng)皿:直徑90 mm.

4.1.10酒精燈 、燒杯、鑷子等。

4.2主要材料及準(zhǔn) 備

4.2.1無(wú)菌濾紙

定性試紙,尺寸為(25士1) mmX (25士1)mm,置于121C .0.1 MPa壓力蒸汽滅菌器中保持30 min

滅菌后備用。

4.2.2滅菌處理

培養(yǎng)皿.試管和移液器槍頭等需要滅菌的用品,使用前需用普通報(bào)紙或牛皮紙袋包裝好后,置于壓

力蒸汽滅菌器中,用溫度121C、壓力0.1 MPa,滅菌30 min.

4.3試劑和培養(yǎng)基

4.3.1消毒劑:75%乙醇溶液。

4.3.2潤(rùn)濕劑:吐 溫80、N甲基乙磺酸(N methyltaurine).二辛磺化丁二酸鈉(Dioctyl SodiumSulp-

hosuccinate)中任選- - .

4.3.3察氏(Czapek)培養(yǎng)基 :

-硝酸鈉(NaNO3),2.0 g;

磷酸氫二鉀(K;HPO,),1.0g;

氧化鉀(KCI),0.5 g;

硫酸鎂(MgSO,●7H2O),0.5 g;

.硫酸亞鐵(FeSO,),0.01 g;

.蔗糖,30 g.

取上述成分加入1 000 mL 0. 05%潤(rùn)濕劑水溶液中,加熱溶解后,用0.1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)

pH使其在(25士1)C時(shí)pH為6. 5,分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121 C .0.1 MPa壓力滅菌30 min.

上述1 000 mL培養(yǎng)液中加入15 g瓊脂,加熱熔化,用0.1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH使其在

(25士1)C時(shí)pH為6. 5,配制固體培養(yǎng)基,分裝后置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)121 C、0. 1 MPa壓力滅

菌30 min.

4.3.4馬鈴薯-葡 萄糖培養(yǎng)基(PDA): .

去皮馬鈴薯,200 g;

蔗糖,(20~30)g;

瓊脂,(15~20)g; 

-蒸餾水,1000 mL.

洗凈去皮馬鈴薯200 g,切成小塊,加水適量煮沸30 min后過(guò)濾,在過(guò)濾液中加入葡萄糖20 g、瓊脂

(20~25)g,加水定容至1000 mL,再加熱,待瓊脂溶化后分裝在3個(gè)500 ml細(xì)口三角瓶?jī)?nèi),瓶口加棉

花塞并包防水紙,置于蒸汽滅菌器中,壓力0.1 MPa,溫度121 C,滅菌30 min.滅菌后的培養(yǎng)基先放

于無(wú)菌室或超凈臺(tái)上冷卻至不燙手時(shí),倒人已滅菌的培養(yǎng)皿(直徑10 cm)中,每個(gè)培養(yǎng)皿(15~20)mL,

制成平板培養(yǎng)基備用。