硫代葡萄糖苷簡(jiǎn)稱硫苷，是十字花科蔬菜中的一種重要的次生代謝產(chǎn)物，根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)的不同，可以把硫苷分為脂肪族、芳香族和吲哚族三大類。已發(fā)現(xiàn)的硫苷有200多種。存在于十字花科蔬菜中的約有15種。而存在于芥菜類蔬菜中就有9種。

在芥菜類蔬菜中發(fā)現(xiàn)了兩種不同的硫代葡萄糖苷分布類型，其中丙烯基硫苷是包包芥菜、包心芥菜中主要的硫苷，約占含量的90%；3-丁烯基是小葉芥菜中主要的硫苷，大約占總量的70%。

測(cè)定方法——分光光度法

1）原理

GS在蔬菜中內(nèi)源酶----芥子酶的作用下水解產(chǎn)生葡萄糖，用3,5—二硝基水楊酸法測(cè)定所產(chǎn)生的葡萄糖量，計(jì)算出GS的含量。 

2）實(shí)驗(yàn)步驟 

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 

（1）3,5-二硝基水楊酸的配置取酒石酸鉀鈉182g及用3,5-二硝基水楊酸7g，加熱溶解于500mL蒸餾水中，加入15g氫氧化鈉，溶解后再加4g苯酚及1g無水亞硫酸鈉，溶解后定容至1000mL，放置一周后備用。 

（2）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置取0.100g無水葡萄糖，蒸餾水溶解并定容至100mL，此溶液每mL含葡萄糖1.0mg   

（3）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取6支10mL刻度試管，依次加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，用蒸餾水補(bǔ)足至1mL，加入3,5-二硝基水楊酸溶液3mL混勻，于沸水浴中保溫10min（使其完全反應(yīng)）后取出，冷卻至室溫后定容至10.0mL，于530nm處測(cè)吸光度值，以葡萄糖量為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 

2、樣品的酶解 

選取大頭菜表皮、中間、中心部位，油菜的根、莖、葉部位，蘿卜的表皮、中間、中心部位，準(zhǔn)確稱取研磨每種樣品0.500g兩份，分別置于兩支25mL刻度試管中，各加氟化鈉0.1g。在一支試管中加沸水20mL，立即加熱至沸并保持10min。在另一支試管中則加入35~38度蒸餾水20mL，置37度水浴中保溫酶解1小時(shí)，使GS在芥子酶作用下水解。完成酶解后加熱至沸并保持10min。 

3、GS總量的測(cè)定 

在兩支試管中分別加入6滴中性醋酸鉛，以沉淀其中的蛋白質(zhì)及色素類物質(zhì)，過量的醋酸鉛應(yīng)用飽和的硫酸鈉溶液消除。之后，加蒸餾水定容至25mL，用濾紙過濾至試管中。取濾液各0.5，按葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法，分別測(cè)定其吸光度。  

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1、ISO/TS 12788:2022油菜籽.硫代葡萄糖苷含量的測(cè)定.通過葡萄糖釋放測(cè)定總硫代葡萄糖苷的光譜測(cè)定法

2、NY/T 1582-2007 油菜籽中硫代葡萄糖苷的測(cè)定高效液相色譜法

3、NY/T 3296-2018 油菜籽中硫代葡萄糖苷的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

4、NY/T 3295-2018 油菜籽中芥酸、硫代葡萄糖苷的測(cè)定近紅外光譜法

5、NY/T 1103.3-2006轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品食用安全檢測(cè)抗?fàn)I養(yǎng)素第3部分：硫代葡萄糖苷的測(cè)定

6、SN/T 1868-2007進(jìn)出口油菜籽及其餅粕中硫代葡萄糖苷總量的測(cè)定方法

7、EN ISO 9167:2019菜籽；硫代葡萄糖苷含量的測(cè)定第1部分:高效液相色譜法

8、DIN EN ISO 9167:2019菜籽和菜籽粕硫代葡萄糖苷含量的測(cè)定高效液相色譜法

9、BS EN ISO 9167-1:1995+A1:2013 油菜籽.硫代葡萄糖苷含量的測(cè)定. 高效液相色譜法使用方法

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