飼料中唿唑烷硫酮的測定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中嗯唑烷硫酮的紫外分光光度測定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于菜籽及其加工產(chǎn)品,以及含有菜籽及其加工產(chǎn)品的配合飼料,濃縮飼料和精料補(bǔ)充料中髦唑烷硫酮的測定。

本標(biāo)準(zhǔn)方法的定量限為150 mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

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GB/T5520糧油檢驗發(fā)芽試驗

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T 20195動物飼料試樣的制備

3原理

試樣中的硫代葡萄糖苷在pH7.0緩沖液中,在白芥子酶作用下水解生成異硫氰酸酯,用二氯甲烷萃取后,帶羥基的異硫氰酸酯與乙醇反應(yīng),環(huán)化生成唔唑烷硫酮,用紫外分光光度法測定。

4試劑或材料

除非另有規(guī)定,僅使用分析純試劑。

4.1水:GB/T 6682,二級。

4.2石油醚(沸程30 ℃~60 ℃)。

4.3二氯甲烷。

4.4無水乙醇。

4.5檸檬酸溶液(o.l mol/L):準(zhǔn)確稱取4.20 g檸檬酸(C,H,O。·H.O)溶解于水中,用水稀釋并定容至200mL,混勻。臨用現(xiàn)配。

4.6磷酸氫二鈉(0.2 mol/L):準(zhǔn)確稱取28.39g無水磷酸氫二鈉(Na-HPO,)溶解于水中,用水稀釋并定容至1L,混勻。臨用現(xiàn)配。

4.7︰鹽酸(o.0l mol/L):準(zhǔn)確移取0.9 ml濃鹽酸,用水稀釋并定容至1 L,混勻。

4.8氫氧化鈉溶液(0.01 mol/L):準(zhǔn)確稱取0.40 g氫氧化鈉加水溶解,用水稀釋并定容至1 L,混勻。

4.9 pH7.0緩沖溶液:量取176.5 mL檸檬酸溶液(4.5)于1 000mL.容量瓶中,用磷酸氫二鈉溶液(4.6)稀釋并定容至 1 000mL,混勻,用鹽酸溶液(4.7)或氫氧化鈉溶液(4.8)調(diào)整pH至7.0。臨用現(xiàn)配。

4.10白芥子酶;稱取50 g白芥(Sina pis alba L.)種子(按照GB/T5520做發(fā)芽率試驗,72h內(nèi)發(fā)芽率須大于85%,保存期不超過兩年)粉碎后,置于500 mL.燒杯中,加入 100 mL.石油醚(4.2),攪拌2min,靜置,棄去上層液體,重復(fù)脫脂10次,使脂肪含量低于2%,置通風(fēng)櫥內(nèi)使溶劑揮干,然后再粉碎一次，