簡(jiǎn)介：Nucleofector核轉(zhuǎn)染技術(shù)

隨著系統(tǒng)生物學(xué)與交叉學(xué)科方法的應(yīng)用，要求細(xì)胞和系統(tǒng)模型越來(lái)越接近體內(nèi)細(xì)胞的功能。這就意味著將來(lái)的細(xì)胞 轉(zhuǎn)染多數(shù)會(huì)是原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。而傳統(tǒng)的方法很難成功轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞。另外即使使用細(xì)胞系做為系統(tǒng)模型，傳統(tǒng)的 方法也難重復(fù)出好的轉(zhuǎn)染效率與成活率。Nucleofector技術(shù)就從根本上解決這個(gè)問(wèn)題。無(wú)論是原代細(xì)胞、干細(xì)胞 還是細(xì)胞系，它每次都可重復(fù)出很高的轉(zhuǎn)染效率。1998年，Nucleofector技術(shù)開發(fā)成功，2001年上市，是市場(chǎng) 上個(gè)有效的、非病毒介導(dǎo)的、用于原代細(xì)胞與難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染方法?，F(xiàn)在Lonza還在繼續(xù)不斷改革創(chuàng)新，為研 究者推出更多更好的新產(chǎn)品。

原理：

NucleofectionTM技術(shù)是利用電擊在細(xì)胞膜上穿個(gè)小孔。并且綜合優(yōu)化了各種特定細(xì)胞轉(zhuǎn)染程序與轉(zhuǎn)染液，使得轉(zhuǎn)染物質(zhì) （如DNA、RNA等）不僅可以進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，而且可直接通過(guò)核膜進(jìn)入細(xì)胞核。這使得細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率高可達(dá)99%。

Nucleofector技術(shù)的組成：

Nucleofector技術(shù)由Nucleofector儀器、細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑和操作手冊(cè)組成

※ Nucleofector儀器：

1. 模塊化設(shè)計(jì)，各模塊可單獨(dú)配置；

2.核心模塊內(nèi)置各種細(xì)胞優(yōu)化的電極參數(shù)，可直接選擇；

3.X模塊提供中低通量(1-16樣)，中低細(xì)胞數(shù)量(約1e+5 到1e+7)轉(zhuǎn)染；

4. Y模塊提供24孔板直接貼壁轉(zhuǎn)染；

5.96模塊提供高通量(96樣)，低細(xì)胞數(shù)量(約1e+5)轉(zhuǎn)染；

6.LV模塊提供低通量，大量細(xì)胞直接轉(zhuǎn)染 (1e+8到1e+9)；

※ 試劑盒：包含有轉(zhuǎn)染溶液、添加劑、專用電極杯、吸管、陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染試劑為細(xì)胞轉(zhuǎn)染提供保護(hù)，即保證了 高的轉(zhuǎn)染效率與成活率，又幫助細(xì)胞維持良好的生理功能性狀。我們提供有一系列的優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑盒與操作手冊(cè)。

※ 數(shù)據(jù)庫(kù)與操作手冊(cè)：我們的在線數(shù)據(jù)庫(kù)提供600種以上細(xì)胞的轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)和操作手冊(cè)。優(yōu)化的操作手冊(cè)除了操作手冊(cè)除了 操作指導(dǎo)外，還包括細(xì)胞來(lái)源、傳代、生長(zhǎng)條件、培養(yǎng)基以及轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)等細(xì)節(jié)技巧。

具兼容性的模塊：NucleofectorX模塊

針對(duì)不同數(shù)量級(jí)的細(xì)胞，提供不同的電極杯。

X模塊可以使用兩種不同形式的聚合材料電極，分別是如下電極杯和電極板條

100ul電極杯

※ 新式可導(dǎo)電材料的電極杯替代了原來(lái)鋁制電極杯

※低通量但是一次可轉(zhuǎn)較大量的細(xì)胞 (適用于生化應(yīng)用或Western Blot實(shí)驗(yàn))

16孔20ul電極板條

※ 與96孔電極杯的板條一致

※ 中通量，低細(xì)胞數(shù)量（報(bào)告基因分析，RNAi）

可在相同的條件下轉(zhuǎn)不同數(shù)量的細(xì)胞

X模塊使用的相同材質(zhì)制成的20ul電極板條與100ul電極杯，X模塊中不同的電極模式可選用相同的電轉(zhuǎn)程序(系統(tǒng)可自動(dòng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù)，客戶無(wú)需進(jìn)行額 外操作)，實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的方便性與靈活性大化。一旦其中一種電極形式優(yōu)化好，另一種就很容易轉(zhuǎn)化好。不同通量的電轉(zhuǎn)條件也很容易轉(zhuǎn)化。 96孔模塊的操作手冊(cè)也適用于X模塊。

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