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荷蘭賽迪/測(cè)迪 cedi diagnostics公司 bovigam 牛結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素elisa檢測(cè)試劑盒

 

牛結(jié)核病的體外診斷試劑盒，獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室使用 

一、簡(jiǎn)介 

牛結(jié)核病是由牛結(jié)核分枝桿菌感染引起的一種疾病，均有發(fā)生，在奶牛業(yè)中具有非常重要的地位。在一些國(guó)家，某些奶牛群的總體發(fā)病率接近60-70％。

 

二、描述 

bovigam tm 是一種牛結(jié)核病的體外快速診斷試劑盒，其原理基于血液 t 淋巴細(xì)胞對(duì)牛結(jié)核分枝桿菌 ppd的細(xì)胞免疫反應(yīng)。 

結(jié)核菌素ppd抗原遞呈到全血組織培養(yǎng)物中的淋巴細(xì)胞后，感染牛結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞就能產(chǎn)生ifn-γ，并通過(guò)基于單克隆抗體的夾心elisa檢測(cè)到。未感染牛結(jié)核分枝桿菌的淋巴細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生ifn-γ，因此，γ-干擾素的檢測(cè)與牛結(jié)核分枝桿菌感染相關(guān)。 

bovigamtm在牛結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)后使用。在皮膚試驗(yàn)檢測(cè)出陰陽(yáng)性結(jié)果后3-30天，可用γ-干擾素試驗(yàn)來(lái)確診。

 

三、現(xiàn)場(chǎng)研究 

用澳大利亞、美國(guó)、愛(ài)爾蘭、新西蘭、意大利和西班牙的13 000頭牛進(jìn)行田間試驗(yàn)，結(jié)果表明bovigamtm在診斷牛結(jié)核病時(shí)更敏感，甚至能檢出早期感染牛。 

在usda/ars/國(guó)家動(dòng)物疾病中心的家畜細(xì)菌病研究中心(美國(guó)愛(ài)荷華州ames)，用20頭對(duì)滅活牛結(jié)核分枝桿菌敏感的hereford食用牛進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室對(duì)照研究。比較了bovigam tm對(duì)美國(guó)ppd和輝瑞澳大利亞ppd的反應(yīng)，表明不管用美國(guó)的ppd還是用澳大利亞的ppd刺激，所有牛都表現(xiàn)為陽(yáng)性。另外，新西蘭的研究表明，試劑盒的特異性不受皮膚試驗(yàn)的影響，在尾根皺襞試驗(yàn)（cft）后3-30天使用時(shí)，本試劑盒比頸部皮膚試驗(yàn)（cct）更加敏感。

 

四、試劑盒組成 

試劑盒儲(chǔ)存于2-8℃。除酶標(biāo)結(jié)合物外，所有試劑在使用前恢復(fù)至室溫(22° ± 5°c)。用完后立即放回2-8℃。

 

牛結(jié)核(bovine tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿菌(mycobacteriumtuberculosis)引起的一種重要的人畜共患病，威脅畜牧業(yè)的發(fā)展和人類的健康。目前，結(jié)核分枝桿菌的檢測(cè)方法主要是針對(duì)細(xì)胞免疫的結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)，但該方法的敏感性和特異性均較低.

1989年wood等建立了一種簡(jiǎn)單的體外檢測(cè)方法，該方法檢測(cè)經(jīng)結(jié)核菌素(purified protein derivative，ppd)刺激16-24h培養(yǎng)的全血釋放的干擾素(ifn-γ)，當(dāng)ppd被遞呈至全血中的淋巴細(xì)胞后，感染牛分枝桿菌的細(xì)胞產(chǎn)生ifn-γ，未感染的細(xì)胞則不產(chǎn)生ifn-γ干擾素。因此，ifn-γ的檢測(cè)與牛結(jié)核的感染相關(guān)。以牛ppd和禽ppd分別刺激全血，可鑒別牛分枝桿菌和副結(jié)核或禽分枝桿菌，降低了假陽(yáng)性率，敏感性和特異性均達(dá)到95 %以上。該方法已被澳大利亞新西蘭和歐美等國(guó)家確認(rèn)為正式試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。